Функции крови. Основные физико-химические константы крови. Форменные элементы крови
. Пипеткой добавлять по каплям дистиллированную воду до выравнивания цвета полученной смеси с цветом стандартных растворов. Каждый раз после добавления воды содержимое пробирки тщательно перемешивать стеклянной палочкой. Сравнивать цвета следует в проходящем дневном свете, держа гемометр в вытянутой руке.
. Определить количество гемоглобина в исследуемой крови в г% по показаниям шкалы градуированной пробирки на уровне нижнего мениска окрашенного раствора.
. Рассчитать количество гемоглобина в относительных единицах Сали. Пересчет произвести с учетом того, что в стандартном растворе 166,7 г/л (16,67%) гемоглобина соответствуют отн. ед. Сали.
. В протоколах кратко описать ход работы, внести полученные результаты и сделать выводы о соответствии физиологической норме.
Рис. 2. Схема гемометра Сали: 1 - пробирки со стандартным раствором хлорида гематина; 2 - пробирка для определения количества гемоглобина; 3 - пипетка для крови; 4 - пипетка для воды; 5 - палочка для размешивания.
Работа №5. Определение осмотической резистентности эритроцитов
Цель работы:
ознакомиться со свойствами осмотической устойчивости эритроцитов и произвести количественную оценку их резистентности по отношению к гипотоническим растворам.
Необходимо для работы:
восемь чистых и сухих пробирок, штатив, мерный цилиндр на 5-10 мл, 1%-ный раствор хлористого натрия, дистиллированная вода, стерильные скарификаторы и пинцет, спирт, йод, вата, стеклянные палочки, мерные пипетки.
Проведение работы:
1. В каждую из пробирок налить 1%-ный раствор хлористого натрия в убывающем количестве от 0,6 до 0,15 мл, затем в каждую пробирку добавить дистиллированной воды до 1 мл. Пробирки пронумеровать.
2. Во все пробирки добавить с помощью капилляра Сали по капле крови. Добавление крови лучше начинать с пробирки, в которую помещен раствор с наименьшей концентрацией, и идти в сторону увеличения. Осторожно перемешать содержимое, чтобы не образовались пузырьки воздуха.
. Оставить пробирки в штативе на хорошо освещенном месте на 30-40 мин, после чего рассмотреть их содержимое (не взбалтывать
!). Проанализировать результаты.
. О границах (уровне) осмотической резистентности эритроцитов судить по степени гемолиза крови в различных гипотонических растворах.
. Результаты наблюдений занести в таблицу:
Концентрация растворов (%) |
Результаты наблюдений |
выводы | |||
Цвет верхнего прозрачного |
Вид остальной части раствора |
осадок |
степень гемолиза |
Уровень резистентности | |
0,60 | |||||
0,55 | |||||
0,50 | |||||
0,45 | |||||
0,40 | |||||
0,35 | |||||
0,30 | |||||
0,25 | |||||
И т.д. |